CAR-T的技术进步：利用LNP技术开创新的CAR-T治疗前景

CAR-T（chimeric antigen receptor T-cell immunotherapy），即嵌合抗原受体 T 细胞免疫疗法，是一种前沿的分子治疗手段。该疗法通过将识别特定抗原的抗体结构域与T细胞激活的细胞内信号结构域相结合，使T细胞能够在识别到目标抗原时被激活，从而绕过传统的抗原呈递过程和免疫调节机制。

       CAR-T细胞疗法具体操作是从患者体内分离T细胞，随后在体外进行选择性扩增和基因工程改造，使其表达嵌合抗原受体（CAR）。通过体外培养，T细胞大量增殖并保持活性，然后通过过继细胞转移技术重新输回患者体内。在体内，CAR-T细胞利用其改造后的特异性，有效地迁移至肿瘤部位并进行浸润，发挥其杀伤肿瘤细胞的功能。

CAR-T治疗流程图

       目前中国已经有5款CAR-T细胞疗法产品获批上市，分别是：

       传统的CAR-T疗法依赖于DNA来表达抗原，通常会引发严重的副作用。这种治疗方式在应对癌症过程中，常见的不良反应主要包括细胞因子释放综合征（CRS）和神经毒性。接受CAR-T细胞治疗的患者通常在第一周内会出现发热、低血压和呼吸功能不全等症状，同时伴有高水平的细胞因子。神经毒性则表现为暂时性的工作记忆丧失、神志不清、甚至癫痫发作等症状。

传统CAR-T疗法的局限性

❖特定的DNA序列被整合到T细胞的基因组中，这可能会导致长期治疗带来潜在的不良反应。

❖环磷酰胺作为CAR-T治疗的预处理药物，其复杂性、副作用以及对患者心理状态的影响，可能会导致患者在治疗前期的依从性较差。

❖随着CAR-T细胞的激活与增殖，嵌合抗原受体的信号被放大。这种放大效应导致药代动力学的不可预测性，可能会使患者的血液药物浓度超出治疗窗口，从而影响治疗效果和安全性。

mRNA作为载体表达CAR-T

       Cartesian公司是一家临床阶段的生物技术公司，开创了用于治疗自身免疫性疾病的mRNA细胞疗法。该公司基于mRNA开发了三项临床管线，包括:

❖mRNA工程化CAR-T细胞产品：Descartes-08（适应症：全身性重症肌无力和多发性骨髓瘤）

❖mRNA工程化同种异体间充质干细胞（MSC）产品：Descartes-30（适应症：急性呼吸窘迫综合症）。

❖mRNA工程化CAR-T细胞产品：Descartes-25（适应症：全身性重症肌无力）。

       Cartesian公司的生产管线：

（图片来源：Cartesian）

       Cartesian选用mRNA作为载体的主要原因有以下几个方面：

❖mRNA分子在细胞质中被翻译成蛋白质后迅速降解，不具备自我复制能力。这种瞬时表达特性赋予了mRNA药物可预测的药代动力学和增强的安全性，避免了长期蛋白质过度表达可能引起的副作用。

❖通过精确设计mRNA分子，可实现对CAR的表达的持续时间和强度的调控，从而确保药物的疗效和安全性。

❖mRNA疗法在治疗前不需要给药来抑制免疫系统，从而提高患者的用药依从性。

传统的CAR-T与mRNA CAT-T的区别‍‍‍

（图片来源：Cartesian）

CAR-T的临床研究

       Cartesian公司为了验证mRNA-CAR-T在自身免疫中的适用性，选择重症肌无力患者作为受试目标。Descartes-08是一种自体BCMA靶向mRNA修饰的CAR-T细胞疗法；BCMA普遍由产生致病性自身抗体的浆细胞克隆表达，通过结合并杀死这些细胞，Descartes-08能够减轻重症肌无力患者的疾病症状。

       多中心试验结果显示，14名重症肌无力患者在使用Descartes-08一年后，重症肌无力指标MG-ADL（重症肌无力日常生活活动评分）和Myasthenia Gravis Composite（MGC，重症肌无力综合评分）均显示出临床上有意义的改善；抗乙酰胆碱受体（AChR）抗体和增殖诱导配体(APRIL)水平出现下降，以上结果均提示Descartes-08具有潜在的临床改善；此外，在治疗过程中没有出现剂量限制毒性、细胞因子释放综合征或神经毒性，常见的不良事件有头痛（6/14）、恶心（5/14）、呕吐（3/14）和发烧（4/14），这些不良事件在输注后24小时内消退，说明CAR-T具有良好的安全性和疗效。

Descartes-08治疗结果统计图[1]

Descartes-08的不良反应报告[1]

mRNA-CAR-T治疗的展望与未来

       mRNA CAR-T疗法，凭借其精确的靶向性、治疗的灵活性、可控的药代动力学以及较高的安全性和耐受性，预示着一个充满希望的未来。随着技术的不断进步和临床试验的深入，mRNA CAR-T有潜力成为治疗的新范式，为患者提供更为有效和个性化的治疗方案，同时减少长期毒性和免疫原性问题。

GenNano™-LNP-mRNA Reagent

迈安纳助力CAR-T疗法：

       本公司开发了人T细胞转染试剂盒GenNano™-LNP-mRNA Reagent。采用新型阳离子脂质设计和独家制剂配方，可在体外高效进行T细胞的改造，转染过程温和，对细胞安全无损伤。

GenNano™-LNP-mRNA Reagent

❖ 有效：转染效率高，转染率可达93%；

❖ 安全：试剂安全无毒，生物相容性好；

❖ 可放大：搭配迈安纳设备可以实现从实验室制备到临床放大生产的转化；

❖ 专利：迈安纳独家专利授权，无侵权风险；

❖ 简便：操作简便，可与CAR-T细胞疗法实验流程轻松衔接。

GenNano™-LNP-mRNA Reagent转染人T细胞实验结果图

细胞转染图及流式细胞分析图孵育48h和72h的流式分析图

       实验结果表明：GenNano™-LNP-mRNA Reagent试剂盒有较高的转染效率，在转染48 h后蛋白表达量在96%以上。

       若您对我们的产品感兴趣请关注本公司微信公众号“迈安纳”，后台留言回复“Luc-mRNA”或“人T细胞转染试剂盒”并留下收件地址及联系方式，我们将非常乐意为您提供一个试用装：Luc-mRNA（荧光素酶mRNA）100微克或人T细胞转染试剂盒试用装。

       请注意，虽然Luc-mRNA和人T细胞转染试剂盒试用装本身是免费的，但邮费需要由您个人承担。这是为了保证试用装能够安全、迅速地送达您的手中。

INano L/L+

       迈安纳提供支持早期研究用途的LNP & mRNA CAR-T解决方案，包括用于LNP制备的设备与脂质混合物，同时也提供通往临床的路径。我们期待这些新技术帮助实现下一代基因疗法。

迈安纳 INano L/L+纳米颗粒制备系统